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第一章绪论

第一节

基因的概念

基因工程与生物工程的关系

第二节基因工程的操作和应用

一、基因工程的操作流程

二、基因工程的应用

第二章基因与基因表达

第一节核酸的结构与性质

一、核酸的化学组成

二、核酸的结构与功能

三、核酸的变性与复性

第二节、基因表达及其调控

一、基因表达调控的基本原理

第三章、DNA的提取与纯化

第一节DNA的提取与纯化

一、碱抽提法提取DNA，提取DNA的其他方法，DNA的定量和纯度测定。

二、掌握基本操作步骤及了解几种常用化学试剂在提取DNA中的作用（例如：SDS、EDTA、巯基乙醇的作用）

第四章核酸分子的酶切、连接和修饰

第一节、工具酶

一、核酸限制性内切酶、同裂酶、同尾酶的概念及运用

二、DNA聚合酶

三、DNA连接酶（T4DNA连接酶的连接特性）

第二节、DNA分子的切割与连接

一、DNA分子的切割与连接的一般原则

二、DNA分子的切割与连接的方法

三、DNA分子的切割与连接的影响因素

第五章、基因工程中的载体

第一节、质粒载体概念

一、质粒载体的一般生物学特性

二、多克隆位点

三、理想质粒载体的必备条件

四、质粒筛选标记

第二节、噬菌体载体

一、噬菌体载体的生物学特性

二、λ噬菌体载体

第三节、其它载体

一、酵母载体、人工染色体载体

二、穿梭载体概念

第六章、目的基因克隆

第一节基因组DNA克隆

一、基因组DNA的制备与片断化

二、基因组DNA文库的构建主要步骤

第二节PCR扩增法

一、RT-PCR法

第三节cDNA文库构建及筛选

一、cDNA文库构建主要步骤

第四节DNA的合成

一、DNA亚磷酸三脂法合成的原理

二、盖帽反应与氧化反应

第五节转化、筛选与鉴定

一、转染，即重组DNA导入受体细胞（大肠杆菌）的主要步骤

二、重组子的筛选与鉴定中蓝白筛选的原理

三、Sanger双脱氧链终止法DNA序列测定的原理

第七章目的基因原核表达

第一节原核表达体系

一、宿主菌（E.coli的特点）

二、原核表达载体的核心元件：启动子、终止子、SD序列

第二节原核表达策略

一、包涵体型表达

二、分泌型表达

三、融合型表达

第八章酵母基因工程

第一节酵母基因表达体系

一、列举两种主要酵母基因表达宿主系统

二、酵母基因表达载体的必备条件

三、基因打靶（基因剔除）

第九章动物基因工程

第一节转基因动物

一、SV40病毒载体

第二节哺乳动物的显微注射转基因操作主要步骤

第三节动物转基因生物反应器应用举例

第十章植物基因工程

第一节常见的植物受体类型

一、原生质体

二、叶盘

三、花

第二节植物基因工程载体

一、双元Ti质粒载体的主要构成

第三节常见的植物转基因方法

一、基因枪法

二、叶盘法

三、根癌农杆菌介导法的主要步骤

第四节转基因植物筛选与鉴定

第五节植物基因工程应用举例

第十一章基因工程相关新技术

第一节生物信息学

第二节芯片技术

第三节酵母双杂交的主要技术原理

第十二章重组DNA技术的应用

第一节DNA与疾病诊断

第二节遗传基因的基因治疗

主要参考文献：《基因工程原理与技术》刘志国主编，化学工业出版社。

《基因工程学原理》马建岗，西安交通大学出版社。

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